SEARCH
You are in browse mode. You must login to use MEMORY

   Log in to start

ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI


🇮🇩
In Indonesian
Created:


Public


0 / 5  (0 ratings)



» To start learning, click login

1 / 25

[Front]


ukuran protein paling kecil adalah?
[Back]


+- 50 residu

Practice Known Questions

Stay up to date with your due questions

Complete 5 questions to enable practice

Exams

Exam: Test your skills

Test your skills in exam mode

Learn New Questions

Dynamic Modes

SmartIntelligent mix of all modes
CustomUse settings to weight dynamic modes

Manual Mode [BETA]

Select your own question and answer types
Specific modes

Learn with flashcards
Listening & SpellingSpelling: Type what you hear
multiple choiceMultiple choice mode
SpeakingAnswer with voice
Speaking & ListeningPractice pronunciation
TypingTyping only mode

ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI - Leaderboard

0 users have completed this course. Be the first!

No users have played this course yet, be the first


ELEKTROFORESIS, WESTERN BLOTTING, & HIBRIDISASI - Details

Levels:

Questions:

56 questions
🇮🇩🇮🇩
Apa saja yg perlu dierhatikan untuk menentukan ukuran protein?
Berat molekul dan jumlah residu N-terminal
Apa yg harus dilakukan untuk mengukur BM protein?
Polipeptida harus dalam keadaan terurai
Teknik untuk menentukan ukuran protein adalah?
Filtrasi gel analisis sedimentasi electrospray ionization mass spectrometry
Filtrasi gel menggunakan bahan apa?
Detergent SDS (sodium dodecyl sulfate)
Elektroforesis adalah
Suatu pergerakan partikel atau koloid yang bermuatan listrik melalui suatu gel yang dipengaruhi oleh medan listrik pemisahan protein dari suatu campuran dengan menggunakan medan listrik
Kegunaan eletroforesis adalah
Menentukan titik isoelektrik menentukan ukuran protein memisah, mengidentifikasi, pemurnian protein dan fragmen DNA
Struktur yang dapat dipisahkan oleh SDS adalah?
Struktur tersier protein menjadi berbentk linier
Gel elektroforesis adalah
Gel yg berguna sbg saringan agar molekul sesuai dengan uukuran dan bentuknya
Cara kerja SDS adalah
SDS akan melapisi protein dengan muatan negatif yg seragam, yang menutupi muatan intrinsik pada kelompok R. SDS berikatan scr merata dengan protein linier (sekitar 1,4g SDS / 1g protein), artinya bahwa muatan protein sekarang kira-kira sebanding dengan berat molekulnya. SDS juga terdapat pada gel untuk menjaga linearitas protein dan membungkus nya dan tetap dlm muatan negatif selama running
Bagaimana karakteristik protein berlapis SDS?
Molekul linier dengan panjang gelombang dan lebar 18 angstroms yg proporsional sebanding dengan berat molekulnya
Matriks gel yang digunakan untuk SDS page adalah? dan kenapa?
Poliakrilamida, krn tidak bermuatan dan dapat dgn mudah dibuat pada berbagai konsentrasi untuk menhasilkan ukuran pori yang berbeda
Protein yang terbungkus SDS cenderung bergerak menuju mana?
Anoda positif dgn gradasi yg berbeda tergantung BM
Bahan elektroforesis apa saja?
Gel dengan detergen SDS akrilamid
SDS fungsinya ?
Membungkkus atau menyelimuti protein sehingga protein bermuatan negatif sehingga sampel akan berjalan pada gel dr atas ke bawah (tergantung ukuran molekul)
Tahapan dalam elektroforesis tdd? dan jelaskan
Tahap persiapan : - P’buat’n gel pd glass slab & p’cetakan tempat sampel dg comb - m’masuk’k running buffer pd bak upper & lower) - p’siap’n sampel (denaturasi)+RSB(Reducing Sample Buffer) - m’masuk’k sampel pd gigi yg d’cetak dg comb - m’masuk’k marker Tahap kerja : - d’hubung’k dg alir’n listrik dg voltase & ampere ttt - sampel yg d’beri p’nanda RSB b’warna biru akan b’gerak dr atas ke bwh hingga m’capai bak yg b’isi running buffer - Aliran listrik d’mati’k - gel d’lepas dr glass slab
Western Blotting adalah
Teknik transfer protein dari gel elektrofresis ke matriks membran
Fungsi western blotting adalah
Identifikasi dan klasifikasi protein yg spesifik dengan antibodinya
Matriks membran yg digunakan adalah?
Nitroselulosa, PVDF (polyvinil Diode Fluoride), nylon
Di dalam label untuk WB terdapat?
Biotin, probe fluoresen, enzim konjugat
Probe fluoresen yg digunakan adalah?
Fluorescein atau rhodamin
Enzim konjugat untuk WB adalah?
Horseradish peroxidase atau alkaline phosphatase
Jenis substrat WB adalah?
Chromogenic dan fluorogenic
Pewarnaan dalam praktikum menggunakan
Western blue dan rhodamin
Metode pendeteksian dari WB adalah?
Direct dan indirect detection method
Fungsi hibridisasi adalah
Mencari informasi letak fragmen DNA dlm genom analisis transkripsi & regulasi Deteksi penyakit genetik sidik jari DNA
Dasar metode hibridisasi adalah?
Kemampuan asam nukleat untuk menjadi 2 rantai dengan ikatan spesifik/konsisten/hybrid (AT/GC)
Prinsip hibridisasi adalah
Ikatan asam nukleat pelacak (sudah diketahui) dgn asam nukleat target
Macam hibridisasi ada apa saja?
1. hibridisasi southern 2. hibridisasi nothern 3. hibridisasi dot 4. hibridisasi in situ
Fragmen DNA dipisahkan menurut apa dang dengan cara apa?
Berdasarkan ukuran dengan cara elektroforesis gel agarosa
DNA yg telah menempel pada membran nilon lalu diapakan?
Dihibridisasi dengan pelacak DNA berlabel radioaktif dan autoradiografi
Target hibridisasi nothern, hibridisasi dot, hibridisasi in situ adalah?
N= fragmen RNA yg telah dipisahkan dgn elektroforesis D= asam nukelat (DNA/RNA @ membran) I= DNA/RNA @preparat sitologis
Hibridisasi nothern, dot, insitu menggunakan pelacak apa
N= pelacak DNA berlabel D= pelacak DNA/RNA berlabel I= pelacak DNA/RNA berlabel
Proses kerja WB adalah?
- Blotter td dr 2 sisi, d’antara kedua sisi dalam d’letak’k : bantalan (spon) – bbrp lb.kertas whatman yg d’basah’i buffer blotting – membran nitroselulose – gel protein yg tlh d’running – bbrp lb. kertas whatman basah – bantalan. - Alat electro blotter d’hubungkan dg listrik, proses b’jalan bbrp jam. - Stlh proses b’akhir membran yg tlh b’isi pita-pita protein dr gel d’laku’k blocking - Stlh blocking, d’inkubasi’k dg antibodi primer - d’cuci & d’inkubasi dg antibodi sekunder yg tlh d’label dg enzim - d’tambah’k substrat utk p’baca’n hasil
Deteksi hibridisasi dengan cara?
Film X-ray (untuk label radioaktif) reaksi warna (untuk non radioaktif)
Pelacak label nonradioaktif adalah
Kolorimetri, fluorescent, chemiluminens, spektrofotometer, fluorometer, luminometer
Proses hibridisasi dipengaruhi oleh
Tingkat komplementasi tinggi, dupleks stabil, suhu tertentu
Fungsi washing adalah
Utk m’hilang’k k’lebih’n pelacak yg tdk m’tempel pd DNA target yg spesifik
Bagaimana cara memindahkan DNA untai tunggal pd membran?
Dipanaskan dengan suhu 80 derajat atau dengan sinau ultraviolet
Stabilisasi dupleks tergantung pada
Jumlah basa komlemen jenis bbasa komplemen kadar garam suhu , pelacak dgn ukuran pendek, titik leleh rendah
Hibridisasi insitu untuk mendeteksi apa?
DNA/RNA spesifik, jaringan, virus, koloni mikroorganisme
Untuk hibridisasi insitu, DNA sel didenaturasi mengunakan apa? dan pelabelan menggunakan apa?
Denaturasi = formamide pelabelan menggunakan radioaktif/biotin DNA atau RNA dengan komplementer mRNA pada jaringan